Вирус простого герпеса микробиология

Простой герпес

Простой герпес

Заболевание имеет несколько клинических форм, но чаще всего вирус персистирует в организме, и болезнь имеет бессимптомное течение. Обычные клинические проявления — везикулярная сыпь на коже и слизистых оболочках, редко возникает менингоэнцефалит, кератит и генерализованная форма у новорожденных. Вирус герпеса 1-го типа проникает в организм еще в раннем детстве и постоянно персистирует у 70-90% взрослых людей. Передается контактным путем через слюну, посуду, бытовые вещи. Вирус 2-го типа передается половым путем и вызывает генитальный герпес. Лабораторная диагностика включает проведение вирусоскопичних, ускоренных, вирусологических и серологических методов. В зависимости от клинических проявлений материалом для исследования служат слюна, содержимое пузырьков, корочки, ликвор, мазки из язв на слизистой оболочке рта, половых органов, роговицы при аутопсии — кусочки головного и спинного мозга и паренхиматозных органов. Взятый материал лучше сохранять в 10% сыворотке при температуре — 70 ° С.

Микроскопия

Соскобы, мазки, пухирцевих содержание после немедленной фиксации в смеси Никифорова окрашивают по методу Романовского-Гимза и исследуют под иммерсионным объективом на наличие гигантских многоядерных клеток с характерными внутриядерными включениями (тельца Каудри). Для экспресс-диагностики используют электронную микроскопию, реакцию иммунофлюоресценции, иммуноферментный анализ, генетическую диагностику. Под электронным микроскопом исследуют содержимое пузырьков, жидкую фракцию корок после их гомогенизации в дистиллированной воде, смывы из элементов сыпи. Выявление 2-3 вирионов с типичной морфологией вполне достаточно для установления диагноза. Быстрое выявление герпетического антигена возможно в реакции иммунофлюоресценции. Мазки из пухирцевих жидкости язв на роговице или осадка из ликвора фиксируют и обрабатывают противогерпетической флуоресцентной сывороткой. Антиген находят в цитоплазме и ядрах пораженных клеток с характерным золотисто-зеленым свечением. Вирусспецифического антиген в исследуемом материале легко обнаруживают с помощью иму ноферментного анализа, чувствительность и специфичность которого может достигать 95-96%. Выделение герпесвирусов. Изоляция вирусов проводят путем инокуляции исследуемого материала в культуре клеток почечного эпителия кролика, куриного эмбриона, амниона человека, HeLa и др. Или заражением мышей-сосунков, хомячков, кроликов, куриных эмбрионов. Репродукция вирусов в культурах клеток наступает через 4-7 дней. Она сопровождается развитием цитопатических изменений, образованием гигантских многоядерных клеток и синцития. У мышей возникают параличи и смерть, у кроликов через 2-5 дней наблюдают кератит, в хомячков заболевание заканчивается летально. Нахорионалантоисний оболочке куриных эмбрионов через 48 часов появляются выпуклые непрозрачные бляшки. Выделенные штаммы вирусов идентифицируют с помощью стандартных противогерпетических сывороток в тестах нейтрализации на культурах клеток, лабораторных животных или куриных эмбрионах. Серологическая диагностика Серологическую диагностику проводят путем постановки реакции непрямой гемагглютинации, иммунофлюоресценции и иммуноферментного анализа обязательно методом парных сывороток. Диагностическое значение имеет нарастание титра антител в 4 раза и более. Серологическая диагностика простого герпеса значительной степени затруднена из-за широкой циркуляции вирусов среди населения и наличием общих антигенов у 1-го и 2-го серовариантив герпетических вирусов. При первичном заболевании простой герпес определенное диагностическое значение имеет постановка РСК для обнаружения комплементсвязывающих антител. Особенно важное значение при этом приобретает определение Ig М.

категории раздела

  • Хирургический профиль

Данная книга предназначена студентам медицинских образовательных учреждений. Это краткое пособие поможет при подготовке и сдаче экзамена по микробиологии. Материал изложен в очень удобной и запоминающейся форме и поможет студентам за сжатый срок детально освоить основные концепции и понятия курса, а также конкретизировать и систематизировать знания.

Книга: Микробиология: конспект лекций

2. Вирус герпеса

2. Вирус герпеса

Семейство Herpesviridae включает в себя подсемейства:

1) a-herpesviruses (I и II типов, герпес-зостер);

Относятся к ДНК-овым вирусам. ДНК двухнитевая, линейная. Геном состоит из двух фрагментов: длинного и короткого. Нить ДНК намотана на центральную белковую культуру. Капсидная оболочка построена из простых белков, имеет кубический тип симметрии. Имеется суперкапсидная оболочка (липидная мембрана со слоем гликопротеидов), неоднородная по строению, образует шиповидные отростки.

Герпес-вирусы относительно нестабильны при комнатной температуре, термолабильны и быстро инактивируются растворителями и детергентами.

a-герпес типа I вызывает афтозный стоматит в раннем детском возрасте, лабиальный герпес, реже – герпетический кератит и энцефалит.

a-герпес типа II вызывает генитальный герпес, герпес новорожденных, является предрасполагающим фактором к развитию рака шейки матки.

Герпес-зостер является возбудителем опоясывающего лишая и ветряной оспы. Это типичная герпес-вирусная инфекция. Клинически проявляется появлением пузырьков на коже по ходу ветвей соответствующих нервов. Заболевание протекает тяжело, но быстро наступает выздоровление.

После перенесенной инфекции остается пожизненный иммунитет. Однако возможны рецидивы болезни, связанные с персистенцией вируса в нервных ганглиях.

После перенесенного герпес-вирусного заболевания вирус пожизненно персистирует в нервных ганглиях (чаще тройничного нерва). При снижении защитных сил организма происходит развитие вирусной инфекции.

b-герпес (цитомегаловирус) при размножении в клетках культуры вызывает цитопатические изменения. Имеет сродство с клетками слюнных желез и почек, вызывая в них образование крупных многоядерных включений. При развитии заболевания имеют место вирусемия, поражение внутренних органов, костного мозга, ЦНС, развитие иммунопатологических заболеваний.

g-герпес-вирус (вирус Эпштейна-Бара) вызывает инфекционный мононуклеоз. Может являться предрасполагающим фактором в развитии опухолей.

1) выявление характерных многоядерных гигантских клеток с тельцами включений в соскобах из области поражений;

2) культивирование в куриных эмбрионах;

3) биологическая проба;

4) серологические исследования (РСК, ИФА);

5) метод прямой иммунофлюоресценции с моноклональными антигенами.

1) обнаружение крупных цитомегаловирусных клеток в моче и слюне;

2) культивирование в культуре фибробластов эмбриона человека;

3) серологическое исследование (РСК);

1) выделение вируса в культуре фибробластов;

2) микроскопия мазков осадка мочи, слюны для выявления типичных гигантских клеток;

3) серологические методы (РСК, РПГА и РН).

1) противовирусные препараты (ацикловир);

Герпесвирусы (семейство Herpesviridae)

Герпесвирусы (от греч herpes — ползучий) —семейство крупных оболочечных ДНК-содержащих вирусов. вызывающих разнообразные инфекции.

Выделены следующие популяции вирусов герпеса: 1. Вирус простого герпеса — ВПГ тип 1 (Herpes simplex virus тип 1 — HSV-1), или герпесвирус человека ГВЧ-1; 2. Вирус простого герпеса — ВПГ тип 2 (Herpes simplex virus тип 2 — HSV-2), или герпесвирус человека ГВЧ-2; 3. Вирус ветряной оспы — опоясывающего герпеса (Varicella-zoster virus — VZV), или герпесвирус человека ГВЧ-3; 4. Вирус Эпстайна—Барр — ВЭБ (Epstein—Barr virus, EBV), или герпесвирус человека ГВЧ-4; 5. Цитомегаповирус — ЦМВ, или герпесвирус человека ГВЧ-5; 6. Герпесвирус человека тип б — ГВЧ-6 (Human herpesvirus — HHV-6), или герпесвирус человека ГВЧ-б; 7. Герпесвирус человека тип 7 — ГВЧ-7 (Human herpesvirus — HHV-7); 8. Герпесвирус человека тип 8 — ГВЧ-8 (Human herpesvirus — HHV-8).

СемействоHerpesviridae включает три подсемейства, отличающиеся по структуре генома, тканевому тропизму, цитопатологии и локализации латентной инфекции: — подсемейство Alphaherpesvirinae — вирусы герпеса (ВПГ-1, ВПГ-2, VZV): для этой группы характерен быстрый рост. Вирусы размножаются в эпителиальных клетках, вызывая цитолитическое действие. В нейронах вызывают латентную, персистирующую инфекцию; — подсемейство Betaherpesvirinae — вирусы герпеса (ЦМВ, ГВЧ-6, ГВЧ-7): для этой группы характерен медленный рост (латентная инфекция) в клетках эпителия слюнных желез, в гландах, почках, лимфоцитах. Вирусы оказывают цитомегалическое действие (ЦМВ) и лимфопролиферативное действие; — подсемейство Gammaherpesvirinae — вирусы (ВЭБ) растут в лимфобластоидных клетках, оказывают лимфопролиферативное действие. Вызывают латентную инфекцию в лимфоидной ткани, лимфоцитах, эпителиальных клетках рта и глотки. слюнных желез. ВЭБ вызывает размножение В-лимфоцитов и персистирует в них.

Структура. Вирион герпесвируса имеет овальную форму диаметром 150-200 нм. В центральной части вириона находится двунитевая линейная ДНК, окруженная икосаэдрическим капсидом, состоящим из 162 капсомеров. Снаружи вирус окружает оболочка с гликопротеиновыми шипами, сформированными из внутреннего слоя ядерной мембраны клетки. Пространство между капсидом и оболочкой называется тегумент (содержит вирусные белки и ферменты, необходимые для инициации репликации). Геном — двунитевая линейная ДНК. Она состоит: у ВПГ и ЦМВ — из двух фрагментов: короткого S и длинного L, каждый из которых у ВПГ заключен между двумя наборами инвертированных повторов, позволяющим геному рекомбинировать с образованием 4 изомеров; у VZV ДНК также состоит из двух фрагментов: короткого S и длинного L, но содержит один набор инвертированных повторов, поэтому формируется две изомерные формы.

Таблица 4.3. Характеристика герпесвирусов человека (семейство Herpesviridae)

Репродукция. После прикрепления к рецепторам клетки оболочка вириона сливается с клеточной мембраной (1, 2). Освободившийся нуклеокапсид (3) доставляет в ядро клетки ДНК вируса. Далее происходит транскрипция части вирусного генома (с помощью клеточной ДНК-зависимой РНК-полимеразы); образовавшиеся иРНК (4) проникают в цитоплазму где происходит синтез (трансляция) самых ранних альфа-белков (I), обладающих регулирующей активностью. Затем синтезируются ранние бета-белки (П) — ферменты, включая ДНК-зависимую ДНК-полимеразу и тимидинкиназу, участвующие в репликации геномной ДНК вируса. Поздние гамма- белки (Ш) являются структурными белками, включая капсид и гликопротеины (А, В, С, D, Е, F, G, X). Гликопротеины диффузно прилегают к ядерной оболочке (5). Формирующийся капсид (6) заполняется вирусной ДНК и почкуется через модифицированные мембраны ядерной оболочки (8). Перемещаясь через аппарат Гольджи, вирионы транспортируются через цитоплазму и выходят из клетки путем экзоцитоза (9) или лизиса клетки (10).

Клинически значимые представители семейства

Вирус простого герпеса относится к семейству Herpesviridae, роду Simplexvirus. Вызывает простой герпес (herpes simplex), характеризующийся везикулезными высыпаниями на коже, слизистых оболочках, поражением центральной нервной системы и внутренних органов, а также пожизненным носительством (персистенцией) и рецидивами болезни. Вирус простого герпеса включает два типа: ВПГ-1 и ВПГ-2; распространен повсеместно, поражает большую часть населения Земли и существует в организме в латентной форме до момента реактивации. ВПГ-1 поражает преимущественно область рта, глаз, ЦНС, а ВПГ-2 — гениталии, за что и получил название генитального штамма. Структура. Структура ВПГ сходна с другими герпесвирусами. Геном ВПГ кодирует около 80 белков, необходимых для репродукции вируса, взаимодействия вируса с клетками организма и иммунным ответом. ВПГ кодирует 11 гликопротеинов, являющихся прикрепительными белками (gB, дС, gD, дН), белками слияния (дВ), структурными белками, иммунными белками «уклонения» (дС, дЕ, gl) и др. Например, СЗ-компонент комплемента связывается с дС, а Fc-фрагмент IgG связывается с gE/gl- комплексом, маскируя вирус и вирус-инфицированные клетки. Существуют гликопротеины, имеющие общие антигенные детерминанты (gB, gD) для ВПГ-1 и ВПГ-2.

Рис. 4.27.Электронограмма ультратонкого среза вируса Эпстайна—Барр (по А. Ф. Быковскому)